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體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗儀
一、 儀器介紹
實驗?zāi)康模?/span>
本試驗用于檢測受試物對體外培養(yǎng)的哺乳動物細(xì)胞的基因突變作用,包括堿基對突變、移碼突變和缺失等,從而評價受試物引起突變的可能性
應(yīng)用范圍
應(yīng)用于科研、農(nóng)業(yè)、衛(wèi)生、教育、霧霾狀態(tài)可吸入顆粒染毒效果研究等各個領(lǐng)域
符合標(biāo)準(zhǔn)：
GB/T 15670.20-2017《農(nóng)藥登記毒理學(xué)試驗方法第20部分:體外哺乳動物細(xì)胞基因突變試驗》
二、試驗流程
1）細(xì)胞培養(yǎng):
選擇合適細(xì)胞系（如L5178Y、CHO），常規(guī)傳代培養(yǎng)
2）受試物處理:
暴露于不同濃度受試物（需設(shè)陰性/陽性對照）
3）表達(dá)期:
預(yù)留足夠時間（通常7-10天）使突變表型顯現(xiàn)。
4.）突變體篩選:
TK試驗:使用篩選TK突變體。
HPRT試驗:選HPRT突變體。
5）克隆形成分析:
計數(shù)突變集落，計算突變頻率（突變集落數(shù)/存活細(xì)胞數(shù)）
6）數(shù)據(jù)統(tǒng)計:
與對照組比較，判斷突變率是否顯著增加。
三、注意事項
1）細(xì)胞活力控制:受試物濃度需保證細(xì)胞存活率（通常>50%）
2）代謝活化系統(tǒng):需加入S9混合物(模擬體內(nèi)代謝，（如Aroclor 1254誘導(dǎo)的大鼠肝S9）。
3）假陽性/陰性:避免pH、滲透壓等非特異性因素干擾。
4）合規(guī)性: 遵循國際指南（如OECD 490、ICH S2R1）。
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